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化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結(jié)構(gòu)與工作原理簡(jiǎn)介將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x器測(cè)量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應(yīng)底物上光子的數(shù)量,就可以得到免疫反應(yīng)時(shí)的被測(cè)物質(zhì)的濃度在單光 ...
化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結(jié)構(gòu)與工作原理簡(jiǎn)介
將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x器測(cè)量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應(yīng)底物上光子的數(shù)量,就可以得到免疫反應(yīng)時(shí)的被測(cè)物質(zhì)的濃度
在單光子計(jì)數(shù)器問世之前,人們大多采用光度計(jì)作為光信號(hào)的主要檢測(cè)儀器,其原理為通過光電轉(zhuǎn)換器件將光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電壓或電流信號(hào),再加以放大。其主要特點(diǎn)為:結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、性能穩(wěn)定,但靈敏度低、線性范圍較窄。目前常見的光學(xué)檢測(cè)儀器,如:紅外/可見光/紫外分光光度計(jì)、熒光分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、照度計(jì)等均采用類似原理。這類技術(shù)主要采用光敏二極管、光敏電池、光電偶合器(CCD),或者以光電流放大方式工作的常規(guī)光電倍增管作為檢測(cè)器件。
當(dāng)發(fā)現(xiàn)失控信號(hào)時(shí),首先確保化學(xué)發(fā)光免疫分析儀運(yùn)行正常,可以考慮采用如下步驟去分析原因并處理:
1.復(fù)查測(cè)定同一批質(zhì)控品?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析儀的質(zhì)控品往往是復(fù)溶后-20℃冰凍保存,復(fù)查時(shí)一定要保證質(zhì)控品解凍時(shí)間充分并充分混勻。此步主要用以查明人為誤差,還可以查出偶然誤差。重測(cè)的結(jié)果應(yīng)在允許范圍內(nèi)。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍,則可以進(jìn)行下一步操作。
2.新溶一瓶質(zhì)控品,復(fù)查失控項(xiàng)目。確認(rèn)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi)進(jìn)行該操作。如果新溶的質(zhì)控血清結(jié)果在允許范圍內(nèi),那么考慮原來的質(zhì)控血清可能過期、放置時(shí)間過長(zhǎng)而變質(zhì)、儲(chǔ)存環(huán)境出現(xiàn)問題或者被污染等。如果結(jié)果仍不在允許范圍,則進(jìn)行下一步。
3.新開一盒失控項(xiàng)目的試劑,重測(cè)質(zhì)控。確認(rèn)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi)進(jìn)行該操作。如果結(jié)果在控,說明之前上機(jī)的試劑可能有問題,檢查它們的使用有效期和上機(jī)有效期,或咨詢廠家該批試劑信息,以查明問題所在。如果結(jié)果仍不在允許范圍,則進(jìn)行下一步。
4.重新校準(zhǔn)失控項(xiàng)目,重測(cè)質(zhì)控。首先化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線超出穩(wěn)定期是要重新進(jìn)行定標(biāo)的,也只有確定定標(biāo)曲線在有效期范圍內(nèi)才能進(jìn)行2、3步的操作。如果定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi),不到萬不得已不會(huì)用新的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器。如果重新校準(zhǔn)后結(jié)果在控,說明之前的校準(zhǔn)品有問題,檢查之前校準(zhǔn)品的有效期、儲(chǔ)存環(huán)境或詢問廠家該校準(zhǔn)品信息。如果結(jié)果仍不在允許范圍,只有和儀器或試劑廠家請(qǐng)求他們的技術(shù)支援了。
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