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手術(shù)感染八項是各醫(yī)院術(shù)前必查的八項感染指標(biāo),包括:乙型肝炎病毒五項血清標(biāo)志物(乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗體(抗-HBe)、乙型肝炎核心抗體(抗-HBc)、丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)、艾滋病病毒抗原抗體(抗-HIV)和梅毒血清特異性抗體(抗-TP)。旨在手術(shù)過程中防范、減少和避免這些病毒在院內(nèi)的交叉感染和傳播以及防范醫(yī)療風(fēng)險和醫(yī)療糾紛的發(fā)生。本文就我院手術(shù)感染八項的檢測方法及臨床意義,簡要介紹如下。
一、檢測方法
目前,國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院手術(shù)感染八項的檢測方法主要有三種免疫法:兩種酶免疫法(EIA和ELISA)和化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測法(簡稱:化學(xué)發(fā)光法)。
前者優(yōu)點:特異性和敏感性高、成本較低;缺點:操作較復(fù)雜、費時,只能定性檢測;后者優(yōu)點:特異性和敏感性高、操作簡便、快速、定量(如:HbsAg和抗-HBs)/半定量分析;
缺點:檢測成本較高。
二、臨床意義
(一)乙肝五項的臨床意義
HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五項指標(biāo),即通常俗稱的“乙肝五項”或稱“乙肝兩對半”。如何正確分析這些指標(biāo)的臨床意義,是臨床醫(yī)生經(jīng)常遇到而又覺得比較復(fù)雜的問題。
1. 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
HBsAg是機(jī)體感染HBV的標(biāo)志,也是在機(jī)體血清中首先出現(xiàn)的病毒標(biāo)志物。HBsAg出現(xiàn)的時間,與機(jī)體感染HBV的途徑和感染的劑量有關(guān)。如果系輸用 HBsAg 陽性血,2周后即可檢測到HBsAg,如用RIA法檢測,于接種后6天,血清中即可出現(xiàn)HBsAg陽性;如感染劑量少,HBsAg出現(xiàn)陽性的時間可達(dá)3~4個月,甚至6個月;一般在感染HBV后4~6周可出現(xiàn)HBsAg陽性。HBsAg出現(xiàn)陽性后1~7周(平均約4周)才出現(xiàn)肝炎癥狀和肝功能異常。經(jīng)血感染者,其潛伏期約為2個月;經(jīng)口感染者,其潛伏期大約為3個月。
急性乙肝病程一般持續(xù)1-3個月,80%~90%的患者可以臨床治愈。HBsAg陽性在血中一般持續(xù)1-6周,長者可達(dá)20周(14-148天);在肝炎癥狀出現(xiàn)后1~4周或血清轉(zhuǎn)氨酶達(dá)高峰后1~12周消失,如果HBsAg陽性持續(xù)超過6個月仍不轉(zhuǎn)陰則稱為持續(xù)陽性或慢性攜帶狀態(tài); 如系急性乙肝,HBsAg持續(xù)陽性超過6個月則提示慢性化。我國HBV感染(急性和慢性)的人群中每年大約有4%~10%的HBsAg陽性者轉(zhuǎn)陰,同時每年又有約4%~10%的人群由易感人群成為受感染者,因而,人群HBV感染狀態(tài)在不斷變化。HBsAg陽性持續(xù)的時間和急性乙肝慢性化的比例與感染者的年齡有關(guān),年齡愈小,形成持續(xù)感染或病情慢性化的概率愈大;圍產(chǎn)期感染的嬰兒80%將成為HBsAg的攜帶者;幼兒期感染者約30%將成為持續(xù)HBsAg攜帶者,正常成年人感染HBV后形成持續(xù)性感染的比例可能在5%以下;社會普通人群中約35%~50%的HBsAg陽性攜帶者是在母嬰圍產(chǎn)期感染的。最近研究表明:成人急性感染HBV后,慢性化者僅為1%~3%,絕大多數(shù)痊愈。Kaganov等對15歲以下真正急性感染的兒童129名隨訪2~24個月,115名痊愈,且絕大多數(shù)產(chǎn)生了抗-HBs,14名(半歲以下)因暴發(fā)性肝炎死亡,未見慢性化。說明絕大多數(shù)急性乙肝預(yù)后良好,無慢性化。但是,HBV慢性感染者HBsAg轉(zhuǎn)陰十分困難,肝組織學(xué)正常的慢性感染者HBsAg年陰轉(zhuǎn)率為0.8%,肝組織學(xué)證實為慢性肝炎者為0.5%。
HBsAg陽性表示有HBV感染,其感染狀態(tài)有兩種情況:
①有完整病毒復(fù)制,具有傳染性。此時,其它病毒復(fù)制指標(biāo)亦陽性,如HBeAg、HBVDNA、HBVDNA-P 和Pre-S1、S2等;
②無完整病毒復(fù)制,不具有傳染性。HBVDNA整合至宿主細(xì)胞基因組的過程中,表達(dá)其它病毒蛋白的基因丟失,僅有HBsAg表達(dá)而無完整病毒形成。臨床上,HBsAg陽性可見于急性乙肝患者的潛伏期、急性期;慢性乙肝,無癥狀攜帶者;部分肝硬化和肝癌患者的血清中和受HBV感染的肝細(xì)胞漿中。
HBsAg陽性一般來說表明機(jī)體內(nèi)存在HBV感染,但陰性也不能完全排除HBV感染。原因是:
①可能由于HBV和HBsAg含量極少,檢測方法不夠靈敏而漏檢,或因試劑質(zhì)量和操作問題而出現(xiàn)假陰性;
②S基因變異引起HBsAg的表達(dá)和分泌發(fā)生障礙,體內(nèi)雖存在HBV,但血清中測不到HBsAg或很少;
③S基因變異后所表達(dá)的HBsAg 不能被現(xiàn)在廣泛使用的一些試劑所測出[7,8]。后兩者雖HBsAg陰性,但往往伴有HBeAg、抗-HBe和抗-HBc等其他HBV感染標(biāo)志物的陽性。即使真正陰性,也不能完全排除HBV感染,因為有8%的乙肝患者,癥狀開始之前HBsAg已轉(zhuǎn)陰;如抗-HBs或抗-HBe于發(fā)病后2~9個月出現(xiàn)陽性者,仍可診斷為急性乙肝。在暴發(fā)性乙肝中,常???HBs提前出現(xiàn),而HBsAg陰性;輸用HBsAg陰性而抗-HBc陽性的血液后,可發(fā)生急性乙型肝炎。采用PCR技術(shù)可以進(jìn)一步證實,某些HBsAg陰性的肝炎患者及獻(xiàn)血人員中的血清中存在HBVDNA。
在分析HBsAg陽性結(jié)果時,有幾點應(yīng)注意:
①不能以HBsAg滴度的高低來判斷肝炎或感染者病情的輕重。因為HBV感染者血清中HBsAg的滴度經(jīng)常在波動,其滴度高低和病情之間并無直接關(guān)系,HBsAg滴度上升并不表明病情就嚴(yán)重,下降也不表明病情在好轉(zhuǎn);有人甚至認(rèn)為HBsAg滴度和病情呈反比。
②不能以HBsAg的滴度來判斷肝炎的類型。
③HBsAg的滴度高低,也不能用來判斷傳染性的有無。HBsAg本身不含病毒核酸,不具傳染性,但HBsAg陽性血清,不論其滴度高低都可能含有具有傳染性劑量的病毒顆粒。如果HBVDNA整合至宿主肝細(xì)胞DNA中,血清中無游離病毒顆粒,此時HBsAg陽性血液則無傳染性。
④HBsAg滴度不能作為評價或判斷某藥物臨床治療效果的指標(biāo)。前面講過,HBsAg既不反映病情的嚴(yán)重程度,又不含病毒的核酸成份,本身還經(jīng)常波動,以HBsAg滴度的升降說明某種藥物的效果,是沒有科學(xué)根據(jù)的。
2. 乙型肝炎表面抗體(抗-HBs)
抗-HBs是一種中和抗體,對HBV具有保護(hù)性免疫,可中和HBV感染、抵御再次感染。多數(shù)自限性HBV感染的患者,其抗-HBs出現(xiàn)在急性感染的恢復(fù)期,80%的患者于HBsAg消失、臨床癥狀消退數(shù)周至數(shù)月內(nèi)出現(xiàn)抗-HBs???HBs出現(xiàn)的早晚和滴度的高低,與重復(fù)感染有關(guān)。首次感染者,多在4~5個月出現(xiàn),滴度不高,持續(xù)6個月~3年;再次感染者,2周后即可檢出高滴度的抗-HBs???HBs陽性率在急性乙肝恢復(fù)期最高,其他各型乙肝檢出率均低。一般說來,抗-HBs陽性血清HBsAg/抗-HBs-IgM陰性,ALT正常。
抗-HBs陽性可見于:
(1)乙型肝炎的恢復(fù)期;
(2)HBV既往感染者;
(3)乙肝疫苗接種后;
(4)部分暴發(fā)性乙型肝炎。
自然感染康復(fù)后的患者血清抗-HBs和抗-HBc呈雙陽性,由于抗-HBc持續(xù)存在的時間較長(>8~10年),抗-HBs持續(xù)存在的時間較短(6個月~3年),故單項抗-HBs陽性少見(接種乙肝疫苗除外),單項抗-HBs陽性且為低滴度時多為非特異性反應(yīng)所致假陽性。
臨床上,有時能遇到HBsAg與抗-HBs同時陽性,此種模式國外報告,在各型肝炎中,總發(fā)生率為32%;國內(nèi)報告為5.75%。見于以下幾種情況:
(1)抗原和抗體的動態(tài)平衡階段;
(2)抗-HBs為假陽性;
(3)不同HBsAg亞型雙重感染或同型HBV的再次感染;
(4)機(jī)體免疫功能異常,病毒S基因突變后,明顯改變了HBsAg的抗原結(jié)構(gòu),使它不能與野毒株的抗-HBs發(fā)生中和反應(yīng),結(jié)果出現(xiàn)野毒株的抗-HBs與變異株的HBsAg同時持續(xù)存在同一體內(nèi)不能處理HBsAg;
(5)既往感染HBV-1或接種乙肝疫苗者再感染HBV-2。
抗-HBs對機(jī)體的保護(hù)性作用,近年來有不同意見,有人發(fā)現(xiàn)抗-HBs陽性醫(yī)務(wù)人員意外感染HBV可發(fā)生急性乙肝。國內(nèi)駱抗先等應(yīng)用PCR技術(shù)檢測9例抗-HBs陽性患者,4例HBVDNA陽性。抗-HBs對機(jī)體的保護(hù)性可能與不同HBV亞型感染有關(guān),同一亞型的抗-HBs只對同一亞型的HBV感染有保護(hù)性,而對不同亞型的HBV感染則沒有保護(hù)性或保護(hù)性不強(qiáng)。此外,可能還與血液中有效的抗-HBs濃度太低有關(guān)。
3. 乙型肝炎e抗原(HBeAg)
HBeAg是乙型肝炎核心抗原的可溶性成份,常常與血清HBVDNA、DNA-P及Dane顆粒同時存在,為HBV復(fù)制和具有傳染性的標(biāo)志。通常HBeAg遲于HBsAg 1周出現(xiàn),先于HBsAg 2周消失;若HBeAg持續(xù)陽性超過10周,表明病情可能趨向慢性。血清中HBeAg陽性,僅見于:HBsAg陽性的急性肝炎、慢性肝炎、無癥狀HBsAg攜帶者和部分肝硬化、肝癌患者。慢性感染者,隨著年齡增長,HBeAg陽性率下降;慢性乙肝患者HBeAg每年自然陰轉(zhuǎn)率為25.6%。無癥狀攜帶者為9.3%。
一般說來,HBeAg陽性僅見于HBsAg陽性血清中,臨床上,有時也可見到HBsAg陰性而HBeAg陽性,其原因:
①檢測HBsAg的方法不夠靈敏;
②血清中類風(fēng)濕因子的干擾,導(dǎo)致假陽性。
③HBsAg己與抗-HBs形成免疫復(fù)合物的形式存在,故測不出HBsAg。
④在HBsAg消失和抗-HBs出現(xiàn)后,HBV仍留在血清中,其Dane顆粒表面的HBsAg被抗-HBs所包裹,以致檢測不出。
⑤試劑質(zhì)量及操作等原因,也可導(dǎo)致HBeAg的假陽性。
4. 乙型肝炎e抗體(抗-HBe)
抗-HBe出現(xiàn)于HBeAg陰轉(zhuǎn)后,抗-HBe的出現(xiàn)表明傳染性下降。過去認(rèn)為抗-HBe是HBV感染恢復(fù)或無傳染性的指標(biāo)。近年來研究發(fā)現(xiàn),抗-HBe陽性的血清仍可能有傳染性,只是遠(yuǎn)較HBeAg陽性的血清傳染性為小而已。有人用相同HBsAg滴度的分別含HBeAg和抗-HBe的血清接種猩猩,結(jié)果HBeAg陽性血清的傳染性為10-8;而抗-HBe陽性的血清為10-2~10-5。在母嬰傳播研究中亦觀察到基本相同的結(jié)果:HBsAg和HBeAg雙陽性的母親所生嬰兒80~100%感染HBV;而HBsAg陽性,抗-HBe陽性的母親所生嬰兒僅有3%被HBV感染。這些結(jié)果說明,HBeAg陽性血清的傳染性明顯強(qiáng)于抗-HBe陽性血清;抗-HBe陽性血清亦具有一定的傳染性。
一般來說,抗-HBe陽性患者血清中HBV復(fù)制水平較低,病情趨向穩(wěn)定和恢復(fù),但臨床上仍可見到相當(dāng)一部分抗-HBe陽性患者的病情仍波動,或在發(fā)展。其主要原因是HBV并沒有因抗-HBe陽性而消除,HBV在機(jī)體內(nèi)仍存在和復(fù)制。有研究表明:在抗-HBe陽性的慢性活動性肝炎中,采用PCR技術(shù)檢測,87%的患者血清中可檢出HBVDNA。肝內(nèi)HBsAg、HBcAg檢測和HBVDNA原位雜交研究發(fā)現(xiàn):抗-HBe陽性慢性肝炎患者中,26.7%HBV復(fù)制活躍,53.3%為不完全復(fù)制與表達(dá),僅20%為非復(fù)制狀態(tài)。慢性乙肝HBeAg向抗-HBe的血清學(xué)轉(zhuǎn)換可伴有ALT水平升高,隨之HBV復(fù)制水平降低,但并不意味著HBV的徹底清除,肝組織學(xué)正常的HBV攜帶者血清中可檢出HBeAg,而組織學(xué)證實有慢性活動型肝炎存在的患者,其血清中抗-HBe可以陽性,說明HBeAg不一定是慢性乙肝活動的標(biāo)志,抗-HBe亦不能作為健康攜帶的指標(biāo)。
抗-HBe一般不與HBeAg同時陽性,如有同時檢出的報告,可能為不同亞型(e1、e2、e3)感染所致;抗-HBe與 HBeAg同時陰性也甚少見,有此情況可見于:①HBeAg和抗-HBe滴度均過低,檢測方法靈敏度不夠;②檢測時,正處于HBeAg消失而相應(yīng)抗體尚未產(chǎn)生;③某些HBsAg攜帶者有獲得性免疫缺陷綜合征,不能形成抗-HBe。
5. 乙型肝炎核心抗體(抗-HBc)
抗-HBc是HBV抗體系統(tǒng)中出現(xiàn)較早的抗體,急性HBV感染,HBsAg出現(xiàn)后3~5周,臨床癥狀出現(xiàn)之前即可檢出,且在肝炎恢復(fù)期呈高滴度;HBsAg陽性的時間越長,抗-HBc的滴度越高[2, 9]。臨床上,多以競爭抑制法檢測抗-HBc,為總抗體,包括IgG、IgM、IgA和IgE型抗-HBc,早期以抗-HBcIgM為主,持續(xù)6~18周,以后以抗-HBcIgG為主,該抗體可在體內(nèi)持續(xù)數(shù)年甚至數(shù)十年。通常,高效價的抗-HBc,見于急、慢性肝炎和HBsAg攜帶者,并表明HBV復(fù)制可能仍活躍,血清具有傳染性;低效價的抗-HBc則表示既往感染過HBV,一般無傳染性。
抗-HBc單項陽性是臨床中一種常見的模式,其發(fā)生率各地報告不同,大約為0.9~11.9%,對于這種單項抗-HBc陽性的解釋,美國疾病控制中心指出:在排除檢測的假陽性(抑制率≤70%多為假陽性)結(jié)果以后,有以下幾種原因:
①急性感染的恢復(fù)早期(窗口期)。HBsAg減少或消失,而抗-HBs尚未產(chǎn)生,抗-HBc是唯一能檢出的特異性HBV指標(biāo)。
②被動獲得的抗-HBc。HBsAg攜帶者母親所生嬰兒,母親體內(nèi)IgG型抗-HBc可經(jīng)胎盤轉(zhuǎn)移給嬰兒,此種母傳抗-HBc在嬰兒體內(nèi)可存在一年以上;輸用抗-HBc陽性的血液或血制品。
③遠(yuǎn)期感染伴抗-HBs消失。因抗-HBc可持續(xù)存在8~10年以上,而抗-HBs在機(jī)體內(nèi)只持續(xù)存在6個月~3年。
④遠(yuǎn)期感染伴低水平HBsAg。近年來,有學(xué)者認(rèn)為,單項抗-HBc陽性為丙型肝炎病毒(HCV)感染的標(biāo)志,認(rèn)為HCV抗原與HBcAg有相同抗原成分。但是,Hoyos等對心臟手術(shù)患者輸血后非甲非乙型肝炎的前瞻性研究不支持這種觀點。
綜上所述,乙肝病毒五項血清標(biāo)志物,只是HBV基因表達(dá)的抗原物質(zhì)和這些抗原刺激機(jī)體所生的相應(yīng)抗體,本身并不是病毒的核酸成分,因此其本身并沒有傳染性,而只是HBV感染的標(biāo)志,我們可以通過分析HBV的這些血清標(biāo)志物來了解HBV在機(jī)體的感染狀態(tài)。由于單項HBVM陽性可見于多種情況,不同HBVM的不同組合模式又有不同的臨床意義,因此,在分析“乙肝五項”的臨床意義時,不能孤立地、片面地去分析其中的某一項指標(biāo),而應(yīng)該參考其它幾項,有時還應(yīng)參考HBVDNA,DNA-P、Pre-S1、S2等檢查,同時還應(yīng)結(jié)合臨床等綜合分析,才能作出正確的判斷和準(zhǔn)確的評價。
簡單判斷乙肝五項的臨床意義:一般說來,乙肝五項血清標(biāo)志物中,如果病毒抗原標(biāo)志物(HBsAg/HBeAg)陽性,說明存在乙肝病毒感染;抗原、抗體均陰性,無病毒感染;抗原陰性,一項或多項抗體陽性,表示既往感染或康復(fù)期,病毒已清除。
(二)丙型肝炎病毒抗體
HCV感染后的潛伏期為21-84天(平均50天),感染后1-2周內(nèi)血液中即可檢測到HCV RNA,平均50天血清ALT升高。抗-HCV檢測試劑不斷改進(jìn),目前,已發(fā)展至第3、4代,檢測的敏感性和特異性有所提高。雖然,抗體的檢出率得到逐步提高,但仍有不足之處,如病程中抗體出現(xiàn)較遲,平均感染后12周,ALT升高后數(shù)周才檢出抗體。在患者出現(xiàn)癥狀時,僅50%-70%的患者血清中可檢測出抗-HCV,感染3月后,血清中抗-HCV的檢出率可達(dá)90%。部分患者由于免疫缺陷,不出現(xiàn)抗體;抗體也不能區(qū)別急性、慢性和既往感染,抗體水平與病情缺乏一致性,因此,也不能作為判斷病情輕重、預(yù)后及治療的指標(biāo)。
1、檢測方法:
檢測丙型肝炎病毒抗體試驗于1990年在美國食品與藥品管理局(FDA)首次注冊,自那時起,新版的此類試驗和其他FDA批準(zhǔn)的抗-HCV試驗已廣范運用于臨床診斷和無癥狀病人的篩檢。目前臨床常用的檢測方法:
(1)、抗-HCV篩檢法:酶免疫法(HCV- EIA210; HCV- ELISA 310)和加強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光免疫法(CIA)。
(2)、抗-HCV旁證試驗:重組免疫印跡試驗(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗結(jié)果分析和PCR技術(shù)定性/定量檢測HCV RNA。
2、臨床意義:
(1)抗-HCV篩檢法:
陽性結(jié)果:HCV現(xiàn)癥感染、既往感染、假陽性;
陰性結(jié)果:無HCV感染、HCV感染窗口期、微量HCV感染、
(2)重組免疫印跡試驗(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗:
陽性結(jié)果:HCV現(xiàn)癥感染、既往感染;
陰性結(jié)果:無HCV感染、HCV感染窗口期、微量HCV感染。
抗-HCV的臨床意義應(yīng)該結(jié)合抗-HCV旁證試驗(重組免疫印跡試驗(RIBA)-高特異性抗-HCV旁證試驗結(jié)果分析和PCR技術(shù)定性/定量檢測HCV RNA)和肝功能試驗綜合分析判斷。
3、臨床常見類型:
(1) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+ HCV RNA(+)+ALT/AST(+):現(xiàn)癥感染,肝炎活動期;
(2)抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+ HCV RNA(+)+ALT/AST(-):現(xiàn)癥感染,病毒攜帶;肝炎非活動期;
(3) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(+)除外其他原因:現(xiàn)癥感染,肝炎活動;
(4) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(+)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(-):既往感染;微量HCV攜帶,需定期復(fù)查;
(5) 抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(-)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(+):假陽性;其他原因致肝功異常;
(6)抗-HCV篩檢法(+)+RIBA(-)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(-):假陽性;
(7)抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+ HCV RNA(+)+ALT/AST(+):急性感染窗口期;微量HCV感染;隱匿性肝炎;
(8)抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+ HCV RNA(+)+ALT/AST(-):微量HCV感染攜帶;
(9) 抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(+):未感染HCV;其他原因致肝功異常
(10) 抗-HCV篩檢法(-)+RIBA(-)+ HCV RNA(-)+ALT/AST(-):未感染HCV;
4、PCR技術(shù)定性/定量檢測HCV RNA的臨床意義:
(1)、明確感染和病毒血癥。
(2)、早期診斷抗-HCV陰性急性肝炎。
(3)、診斷抗-HCV陰性免疫功能低下的慢性肝炎。
(4)、慢性HCV感染母親的嬰兒,明確母嬰傳播。
(5)、抗病毒治療前明確治療指征,治療后評價治療效果。
(三)艾滋病病毒抗體
1、檢測方法:
迄今為止,血清學(xué)實驗依然是HIV實驗室診斷的主要依據(jù)。血清學(xué)實驗即HIV抗體檢測,是HIV感染診斷的常規(guī)方法,分為初篩試驗和確診試驗兩個步驟。
(1)HIV抗體篩查試驗:
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、明膠顆粒凝集試驗(PA)、免疫層析/滲濾試驗、快速檢測試驗(RT)等。
ELISA-抗-HIV檢測,是國際上檢測HIV抗體最早、使用最廣泛的檢測方法。從1985年第一代到目前第四代、第五代試劑盒,敏感性和特異性明顯提高,HIV檢測的窗口期不斷縮短。雖然ELISA-抗-HIV檢測有較高的敏感性和特異性,但也有少量假陰性和假陽性。假陰性主要在窗口期或發(fā)病后期抗體滴度下降時出現(xiàn);假陽性主要是因為自身免疫病、腎病、肝病、接種疫苗等影響,但一般來說,假陽性的滴度通常不高。
(2)HIV抗體確認(rèn)試驗:
HIV抗體確認(rèn)試驗包括:免疫印跡法(Western Blot, WB);免疫熒光法(IFA);條帶免疫試驗(LIF);放射免疫沉淀試驗(RIPA)等。國內(nèi)常用的確認(rèn)試驗是免疫印跡法(WB),具有高度特異性。HIV特異性抗體檢測ELISA(高敏感性),加上WB(高特異性),診斷準(zhǔn)確率大于99%,假陽性率約為0.00006%,造成錯誤診斷的機(jī)會幾乎是零。
2、窗口期HIV感染的診斷:
抗-HIV陰性,不一定沒有感染,可能處于病毒感染的窗口期,即從機(jī)體HIV病毒感染到產(chǎn)生抗體的這段時間,窗口期的實質(zhì)是特異性病毒抗體從無到有、從少到多的轉(zhuǎn)變過程,決定窗口期長短的因素有兩個,一是機(jī)體對病毒感染產(chǎn)生抗體應(yīng)答的程度,另一個是檢測方法的敏感性。一般平均為2~3月(可以1~9月),但95%以上的HIV-1感染者產(chǎn)生抗體的時間是在6個月以內(nèi)。診斷的方法有:
(1)P24抗原檢測:
機(jī)體感染HIV后,P24抗原是較早能從血清中檢出的病原學(xué)標(biāo)志,感染后約2~3周即可檢出,1~2月左右進(jìn)入抗原高峰,然后隨著抗體的產(chǎn)生形成抗原抗體復(fù)合物,由于抗體的中和作用,P24抗原濃度下降至難以測出的水平。P24抗原檢測其敏感性可達(dá)88.7%,特異性可達(dá)100%。
(2)HIV RNA檢測:
利用分子生物學(xué)PCR技術(shù)可以定性和定量檢測艾滋病病毒核酸(HIV RNA),具有較高的敏感性和特異性,在HIV 感染早期檢測診斷具有重要意義,對判斷臨床治療效果、估計預(yù)后也是較好的指標(biāo),同時也是制定和調(diào)整治療方案的主要依據(jù)。目前,臨床常用的核酸檢測方法:逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)和實時熒光定量PCR。
(四)梅毒血清特異性抗體
1、梅毒感染血清學(xué)實驗:
血清梅毒抗體檢測是臨床診斷梅毒感染的重要方法。梅毒螺旋體進(jìn)入人體后4-6周,血清中可產(chǎn)生抗類脂抗原的非特異性抗體和抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體。根據(jù)梅毒螺旋體進(jìn)入人體后產(chǎn)生兩種抗體的特征,將血清學(xué)試驗分為兩大類。
(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗:
①性病研究實驗室試驗(VDRL);
②不加熱血清反應(yīng)素試驗( USR);
③快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR);
④甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)。
目前,最常用的具有代表性的方法為RPR、TRUST 。適用于梅毒篩查,療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染的檢查。
(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗:
①梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA);
②梅毒螺旋體血細(xì)胞凝集試驗(TPHA);
③熒光梅毒螺旋體抗體吸附試驗(FTA-ABS);
④梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(TP-ELISA);
⑤梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(TP-WB)等。
手術(shù)感染八項中梅毒血清特異性抗體(抗-TP)的檢測方法即梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗中的梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(TP-ELISA)。
2、非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗的臨床意義:
(1)陽性可能表示:①現(xiàn)癥感染;②復(fù)發(fā)或再感染;③生物學(xué)假陽性;
(2)臨床用于梅毒篩查,抗梅毒治療療效觀察。
3、梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗的臨床意義:
(1)陽性表示:①現(xiàn)癥感染;②既往感染;
(2)感染了梅毒,梅毒螺旋體抗體終生陽性,因此,不能作為評價治療效果的指標(biāo)。
(3)可作為非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(如RPR等)初篩陽性標(biāo)本的確證試驗。
4、梅毒感染的血清學(xué)診斷:
非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(如RPR等)初篩陽性標(biāo)本須要梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗的確證試驗,以除外生物學(xué)假陽性;梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗陽性結(jié)果,如需判斷是否現(xiàn)癥感染、還是既往感染或是復(fù)發(fā)、再感染、或抗梅毒療效評價則需非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(如RPR等)幫助。
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